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dc.rights.licensehttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0es_MX
dc.creatorLUZ YOLANDA URQUIETA RAMIREZes_MX
dc.date2018-05-
dc.date.accessioned2018-08-14T04:02:53Z-
dc.date.available2018-08-14T04:02:53Z-
dc.date.issued2018-05-
dc.identifier.urihttp://www.repositorio.ugto.mx/handle/20.500.12059/355-
dc.description.abstractLa virulencia de Entamoeba histolytica es un proceso multifactorial, en el que están involucrados factores tanto del hospedero como de la amiba. Entre los factores del parásito se encuentran los amebaporos, las cisteín proteasas y la lectina; sin embargo, no se descarta la participación de otras moléculas. Algunas de estas moléculas candidatas son las esfingomielinasas (SMasas), enzimas que catalizan la hidrólisis de esfingomielina (SM) produciendo ceramida, la cual está involucrada en diferentes procesos celulares como proliferación celular, apoptosis y lisis celular. En el grupo de trabajo se ha reportado que el genoma de E. histolytica posee tres genes que codifican para SMasas neutras, los cuales se expresan y producen proteínas con actividad enzimática. El objetivo del presente es el análisis funcional de las SMasas neutras, para lo cual se obtuvieron trofozoítos transfectantes para silenciar o sobreexpresar los genes que codifican para dichas enzimas. Se encontró que la actividad de SMasa neutra disminuye con el silenciamiento de los genes y aumenta con su sobrexpresión, lo que permitió evaluar su participación en la virulencia del parásito. La nSMasa3 está asociada con la muerte y lisis celular, mientras que la nSMasa1 y nSMasa2 con la destrucción de monocapas celulares. Mediante ensayos de inmunodetección y microscopía confocal se encontró que estas proteínas están asociadas principalmente a la membrana plasmática, lo que sugiere que el efecto citotóxico y citolítico es dependiente de contacto. La actividad de nSMasa aumentó en amibas expuestas a H2O2, radiación UV-C o choque térmico, sin embargo, las cepas sobre-expresantes no mostraron cambios en su actividad. Esta es la primera vez que se demuestra la participación de las nSMasas en la virulencia de E. histolytica, principalmente de la Ehnsm3.es_MX
dc.language.isospaes_MX
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccesses_MX
dc.subject.classificationCGU- Doctorado en Ciencias (Biología) Directoes_MX
dc.titleAnálisis funcional de esfingomielinasas neutras de Entamoeba histolyticaes_MX
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/doctoralThesises_MX
dc.creator.idinfo:eu-repo/dai/mx/curp/UURL870507MGTRMZ07es_MX
dc.subject.ctiinfo:eu-repo/classification/cti/24es_MX
dc.subject.keywordsBiología celulares_MX
dc.subject.keywordsMicrobiologíaes_MX
dc.contributor.roleanalistaes_MX
dc.type.versioninfo:eu-repo/semantics/publishedVersiones_MX
dc.contributor.oneLUIS FELIPE PADILLA VACAes_MX
dc.contributor.twoLUIS FERNANDO ANAYA VELAZQUEZes_MX
dc.contributor.idoneinfo:eu-repo/dai/mx/curp/PAVL640407HGTDCS04es_MX
dc.contributor.idtwoinfo:eu-repo/dai/mx/curp/AAVL550825HGTNLS01es_MX
dc.contributor.roleonedirectores_MX
dc.contributor.roletwodirectores_MX
dc.contributor.rolethreeanalistaes_MX
dc.contributor.rolefouranalistaes_MX
dc.contributor.rolefiveanalistaes_MX
dc.contributor.rolesixanalistaes_MX
dc.publisher.universityUniversidad de Guanajuatoes_MX
dc.description.abstractEnglishThe virulence of Entamoeba histolytica is a multifactorial process, in which both host and amoeba factors are involved. Among the factors of the parasite are amebapores, cysteine ​​proteases and lectin; however, the participation of other molecules is not ruled out. Some of these candidate molecules are sphingomyelinases (SMases), enzymes that catalyze the hydrolysis of sphingomyelin (SM) producing ceramide, which is involved in different cellular processes such as cell proliferation, apoptosis and cell lysis. In the working group it has been reported that the genome of E. histolytica possesses three genes that code for neutral SMasas, which are expressed and produce proteins with enzymatic activity. The objective of the present is the functional analysis of the neutral SMasas, for which transfectant trophozoites were obtained to silence or overexpress the genes that code for these enzymes. It was found that the activity of neutral SMase diminishes with the silencing of the genes and increases with its overexpression, which allowed to evaluate its participation in the virulence of the parasite. NSMasa3 is associated with cell death and lysis, while nSMasa1 and nSMasa2 with the destruction of cellular monolayers. By means of immunodetection and confocal microscopy tests, it was found that these proteins are mainly associated with the plasma membrane, which suggests that the cytotoxic and cytolytic effect is contact-dependent. The activity of nSMase increased in amoebae exposed to H2O2, UV-C radiation or thermal shock, however, the over-expressing strains did not show changes in their activity. This is the first time that the participation of the nMasas in the virulence of E. histolytica, mainly of the Ehnsm3, has been demonstrated.es_MX
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