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Detección de Listeria Spp. en queso fresco a través de un método isotérmico basado en las regiones V1-V2 del 16S ARNr

2026-08-24T00:00:00Z

Title: Detección de Listeria Spp. en queso fresco a través de un método isotérmico basado en las regiones V1-V2 del 16S ARNr Authors: Martínez González, Katia Ivonne Contributor: JOSE ELEAZAR BARBOZA CORONA Abstract: La listeriosis es una enfermedad transmitida por alimentos causada por Listeria monocytogenes, cuya presencia representa un riesgo importante para la salud pública en México, especialmente por su elevada incidencia en productos lácteos frescos. Esto resalta la importancia de implementar métodos de detección rápidos, sensibles y confiables para prevenir brotes y garantizar la inocuidad alimentaria. El objetivo de este trabajo fue detectar Listeria spp. en queso fresco mediante amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP), utilizando la región V1-V2 del gen 16S ARNr como marcador y comparar el método con técnicas convencionales. Se evaluaron cinco métodos de extracción de ácidos nucleicos y se optimizaron las condiciones de reacción para LAMP considerando variables como concentración bacteriana (1x101 a 1x109 UFC/ml), pureza del ADN, tiempos de incubación y costos. El protocolo establecido cuya detección se basó en el cambio colorimétrico y la cuantificación espectrofotométrica (ΔAbs = 434 – 560 nm), se comparó con PCR convencional y el método microbiológico establecido en la NOM-143-SSA1-1995. Los resultados obtenidos durante la estandarización de la técnica de LAMP demostraron que el método de ebullición fue el más eficiente, compatible y reproducible, permitiendo la detección de L. monocytogenes hasta 1x101 UFC/ml y L. innocua hasta 1x103 UFC/ml; además, alcanzó una sensibilidad de hasta 100 fg de ADN, superando entre 10 y 1000 veces a la PCR convencional, con tiempos de detección menores a 60 minutos. La evaluación del protocolo en un contexto real se probó en 30 muestras comerciales donde se evaluaron valores de pH cercanos a la neutralidad y alteraciones organolépticas asociadas a contaminación por deficiencias en el procesamiento. Las muestras positivas fueron aisladas e identificadas taxonómicamente mediante la secuenciación del gen 16S ARNr y el análisis filogenético, lo que confirmó la identidad de L. monocytogenes con alta similitud (>98%). El protocolo propuesto puede considerarse una herramienta de diagnóstico integral, rápida, sensible y de bajo costo, como alternativa para la detección de Listeria spp. en la industria alimentaria.

Estudio de la absorción de arsénico sobre el metabolismo del cultivo de fresa en sistema hidropónico

2025-08-01T00:00:00Z

Title: Estudio de la absorción de arsénico sobre el metabolismo del cultivo de fresa en sistema hidropónico Authors: Trejo Nava, Elianne Paola Contributor: Osuna López, César Abstract: El arsénico (As) es un metaloide altamente tóxico que puede ser absorbido por las plantas, provocando un estrés que afecta sus procesos vitales. Además, las plantas activan mecanismos de defensa que les permiten adaptarse a condiciones adversas, entre ellos la modulación de rutas metabólicas secundarias y la acumulación de compuestos antioxidantes. Esta problemática adquiere especial relevancia en cultivos de alto valor comercial y nutricional, como la fresa, especie particularmente sensible a la presencia de As. Por lo tanto, el objetivo fue estudiar el efecto de la absorción de As sobre el metabolismo del cultivo de fresa en sistema hidropónico. Primeramente, se utilizó un sistema hidropónico donde se emplearon un control y diferentes concentraciones de As (0.01, 0.1 y 1 mg/L) utilizando As(V) a partir de la sal (Na2HAsO4*7H2O). Tras 110 días de crecimiento y contaminación del cultivo se recolectaron las estructuras vegetales de cada tratamiento para luego secarlas y/o liofilizarlas, triturarlas y tamizarlas. Posteriormente, se evaluó la acumulación de As en la planta de fresa fue mayor en la raíz, con un aumento significativo (p < 0.05) de hasta 223.1 % a 0.01 mg/L en comparación con el control. En el tallo, la acumulación disminuyó hasta un 4.82 % a 1 mg/L respecto a 0.01 mg/L. En hoja se observó una movilización parcial a concentraciones de 0.01 y 0.1 mg/L, pero a 1 mg/L disminuyó significativamente (p < 0.05). Aun así, los factores de bioacumulación (FB) y translocación (FT) fueron > 1, lo que indica que la planta tiene capacidad de absorber y movilizar As, aunque más eficientemente a dosis bajas. Con respecto a las propiedades bioactivas y antioxidantes en las estructuras de la planta existieron diferencias significativas (p < 0.05). Finalmente, para el análisis in silico después de caracterizar los compuestos fenólicos individuales por HPLC, se acoplaron molecularmente.

Análisis molecular de un baculovirus recombinante que expresa la proteína S de SARS-CoV-2

2025-07-25T00:00:00Z

Title: Análisis molecular de un baculovirus recombinante que expresa la proteína S de SARS-CoV-2 Authors: ISRAEL DE JESUS CRISANTO MENDOZA Contributor: MARIA CRISTINA DEL RINCON CASTRO Abstract: Los baculovirus son excelentes vectores de expresión de genes eucarióticos y hasta la fecha, miles de baculovirus recombinantes se han producido en el sistema de expresión Bac to Bac. El objetivo de este trabajo fue la sobreexpresión del gen de la proteína S del SAR-COv-2, en el sistema Bac to Bac de baculovirus para producir grandes cantidades de esta proteína y poder utilizarla para la producción de anticuerpos en sistemas alternos, para la producción y escalamiento en el futuro, de una vacuna contra el SARS-CoV-2. Se partió de un baculovirus recombinante generado con el sistema Bac to Bac, denominado BackSpike. Se realizó la infección de larvas de Spodoptera frugiperda con los viriones recombinantes y se identificaron larvas que presentaron signos de infección a las 72 h.p.i, entre los cuales se incluyen: hemocitos con núcleos hipertrofiados y membranas disgregadas, sin presencia de cuerpos de oclusión. Se extrajo ADN de hemocitos y larvas completas donde se confirmó la presencia del gen de la proteína Spike, de 1000 pb, y la dirección del inserto, de 1200 pb, utilizando diseñados específicamente para esos dos fines. Para identificar a las dos subunidades de la proteína S del SARS-CoV-2 se realizaron geles de poliacrilamida al 12%. Se extrajo proteína total de larvas infectadas y de larvas sin infectar como control negativo, y se observaron 2 bandas de 65-70 kDa en las muestras de larvas infectadas que corresponden a las dos bandas en las cuales se escinde la proteína S durante el proceso de infección. Con el fin de analizar el potencial inmunogénico de la proteína S generada con el sistema Bac to Bac, se realizó una prueba rápida en un ejemplar de ratón hembra de la cepa BALB/c, llevando a cabo tres inoculaciones de la proteína S con adyuvante de Freund. En las pruebas de las características nociceptivas, el peso del ratón mostró una tendencia al alza hasta el día 14 post inmunización, seguido de una ligera disminución. La temperatura corporal se mantuvo estable con una ligera hipotermia después de la tercera inmunización. Por su parte, la reacción a estímulos mecánicos disminuyó solo después de la tercera inoculación, y la respuesta del reflejo pupilar a la luz disminuyó después de la segunda inmunización. Los ensayos de ELISA mostraron producción de anticuerpos anti-IgG contra la proteína S de SARS-CoV-2. El sistema Bac to Bac de baculovirus presentó deficiencias para la expresión de la proteína S del SARS-CoV-2, ésta se pudo expresar en bajas cantidades, sin embargo, desarrolló respuesta inmunogénica en el ratón infectado. Es necesario realizar más pruebas inmunológicas para analizar su efectividad.

Aprovechamiento de Arthrospira platensis para la producción de péptidos bioactivos con propiedades contra la diabesidad

2025-07-01T00:00:00Z

Title: Aprovechamiento de Arthrospira platensis para la producción de péptidos bioactivos con propiedades contra la diabesidad Authors: JOSÉ FERNANDO MUÑOZ ROA Contributor: Ma. Fabiola León Galván Abstract: La diabetes tipo 2 es la segunda causa de muerte en México, y más del 40 % de los pacientes también presentan obesidad, está condición donde convergen ambas enfermedades se denomina diabesidad. Los tratamientos actuales para la diabetes y obesidad provocan efectos adversos como tos crónica y problemas cardiovasculares, entre los más comunes, creando una necesidad de nuevos fármacos. Los péptidos bioactivos se han propuesto como candidatos para ser utilizados como biofarmacos, sin embargo, los ensayos in vivo son tardados y costosos, y en algunos casos, los resultados no son los esperados; en ese sentido, para optimizar el desarrollo de nuevos fármacos, se emplean herramientas como el docking molecular, que permite simular interacciones moleculares y reducen costos y tiempos de investigación. En este estudio, se usaron las 6 proteínas de mayor abundancia de A. platensis para la generación in silico de secuencias peptídicas mediante la hidrólisis enzimática usando 3 enzimas (pepsina, tripsina y quimotripsina) así como su interacción péptido-proteína usando docking molecular. Se encontró que dentro de las secuencias proteicas se tienen secuencias peptídicas encriptadas que muestran actividad biológica contra diabetes, hipertensión, obesidad, cáncer y estrés oxidativo. Los péptidos generados con pepsina pH < 2 son los que mostraron la mayor cantidad de actividades biológicas, destacando la inhibición de la dipeptidil peptidasa 4 (DPP4) involucrada en el bloqueo de la producción de la insulina, y por tanto en el desarrollo de diabetes, y de lipasa pancreatica (LP) involucrada en metabolismo de lípidos. Estas secuencias peptídicas se probaron in silico para evaluar bioactividad en las enzimas DPP4 y LP, usando los fármacos sitagliptina y orlistato como control positivo, respectivamente. Un total de 10 secuencias peptídicas con actividad inhibitoria de la DPP4, mostraron energía de afinidad cercana a la sitagliptina (-7.5 kcal/mol) destacando WF, WQ, GITPAPF, SPSWY y WRD con energías de afinidad.